Les mécanismes métaboliques et moléculaires du catabolisme des protéines induit par l'hyperammoniémie et l'hyperéthanolémie dans les cellules musculaires squelettiques
Hannah Crossland jcp.26881
L'hyperammoniacémie et l'hyperéthanolaémie seraient à l'origine de la myopathie des muscles squelettiques dans les maladies du foie, c'est-à-dire la cirrhose. Malgré cela, les effets singuliers et combinés du catabolisme des protéines induit par l'éthanol et l'ammoniac sont mal définis. En tant que tel, nous avons cherché à disséquer les effets de l'ammoniac et de l'éthanol sur le catabolisme musculaire.
Les myotubes murins C2C12 ont été traités avec de l'acétate d'ammonium (10 mM) et de l'éthanol (100 mM), soit seuls, soit en combinaison pendant 4 heures et / ou 24 heures. Le diamètre des myotubes, la synthèse des protéines musculaires et les voies de signalisation anaboliques et cataboliques ont été évalués. Dans des expériences séparées, les cellules ont été co-traitées avec des inhibiteurs sélectionnés de la dégradation des protéines pour évaluer l'importance des voies protéolytiques dans la perte de protéines avec l'ammoniac et l'éthanol.
L’ammoniac et l’éthanol combinés ont entraîné une réduction de la largeur des myotubes et de la teneur totale en protéines, supérieure à la réduction observée avec l’ammoniac seul. L'ammoniac et l'éthanol ont tous deux entraîné une réduction de la synthèse des protéines, évaluée par incorporation de puromycine. Il y avait également des preuves de déficiences dans la régulation de la traduction des protéines et une augmentation de l'expression protéique des marqueurs de la dégradation des protéines musculaires. La perte de protéines myotubes avec l'ammoniac plus l'éthanol n'a pas été affectée par l'inhibition de l'autophagie, mais a été complètement empêchée par l'inhibition du protéasome. Ainsi, Une incubation combinée de l'ammoniaque et de l'éthanol des myotubes C2C12 a exacerbé l'atrophie des myotubes et la dérégulation des voies de signalisation anaboliques et cataboliques associées à l'un ou l'autre des composants. La dégradation des protéines induite par l'ubiquitine-protéasome semble jouer un rôle important dans la perte de protéines des myotubes avec l'éthanol et l'ammoniac.
