Les nutriments stimulent la biogenèse mitochondriale via les miARN ciblant PGC-1α dans les myotubes C2C12.
López, Claudia Pérez Médecine et sciences dans les sports et les exercices: juin 2019 - Volume 51 - Numéro 6 - p 499–500
OBJECTIF:Plusieurs études ont démontré que des nutriments, tels que la caféine (CAFF) et des acides aminés à chaîne ramifiée, en particulier la leucine (Leu), induisent la biogenèse mitochondriale par le biais de divers mécanismes qui convergent dans l'activation de la PGC-1α, conduisant à une augmentation de l'activité transcriptionnelle et au remodelage mitochondrial. . Les micro-ARN (miARN) sont connus pour agir comme de puissants modulateurs négatifs des expressions géniques impliquées dans les processus cellulaires essentiels. Des preuves récentes suggèrent que miR-494, miR-696 et miR -761 sont impliqués dans la biogenèse mitochondriale par modulation négative de la signalisation PGC-1α. Cependant, il n'est pas clair si ces miARN sont régulés individuellement ou en coopération par la stimulation des nutriments. Par conséquent, notre étude s'est concentrée sur l'effet de Leu et de CAFF sur les fonctions de ces miARN et sur la façon dont il a affecté ses effecteurs en aval,
Méthodes: Après 5 jours de différenciation, les myotubes C2C12 ont été traités avec du Leu (1 et 3 mM) ou CAFF (3 mM) contenant le milieu de Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) sans sérum et Leu pendant 24h. Le sérum et le DMEM sans leu avec 2% d'H 2 0 ont été utilisés comme contrôle. Après 24h de chaque traitement, les cellules ont été récoltées, puis l'ADN, l'ARN et la protéine (fraction entière) ont été isolés pour des analyses d'immunoempreinte et de qPCR. Des micrographies de quatre champs par condition ont été capturées au hasard avant et 24h après le traitement pour mesurer le diamètre du myotube.
RÉSULTATS: Le nombre de copies d'ADN mitochondrial a augmenté de manière significative 24h après l'addition de Leu, en particulier lors du traitement CAFF (p <0,05), par rapport aux cellules contrôles. De même, le diamètre du myotube était significativement plus grand dans deux groupes traités au Leu (≥ 20%, p <0,05), ainsi que dans la supplémentation en CAFF (˜10%, p <0,05), que dans les groupes de contrôle et de prétraitement. Le taux de protéine PGC-1α et le taux de phosphorylation de p70S6K ont également été augmentés dans les deux groupes de traitement. Inversement, les niveaux de miR-494, miR-696 et miR-761 ont été réduits dans les groupes traités au leu, mais seuls les niveaux de miR-761 ont été réduits dans le groupe traité au CAFF.
CONCLUSION: Ces résultats suggèrent que des nutriments tels que Leu ou CAFF peuvent réguler l'expression des miARN ciblant PGC-1α, ce qui conduit ensuite à induire une biogenèse mitochondriale.
