Les mécanismes métaboliques et moléculaires de l'hyperammoniémie et de l'hyperéthanolémie induite par le catabolisme des protéines dans les cellules du muscle squelettique
Hannah Crossland jcp.26881
L'hyperammoniémie et l'hyperéthanolaémie seraient des facteurs déterminants de la myopathie du muscle squelettique dans les maladies du foie, c'est-à-dire la cirrhose. Malgré cela, les effets singuliers et combinés du catabolisme des protéines induit par l'éthanol et l'ammoniac sont mal définis. En tant que tels, nous avons cherché à disséquer les effets de l'ammoniac et de l'éthanol sur le catabolisme musculaire. Les myotubes murins C2C12 ont été traités avec de l'acétate d'ammonium (10 mM) et de l'éthanol (100 mM) seuls ou en combinaison pendant 4 h et / ou 24 h. Le diamètre du myotube, la synthèse des protéines musculaires et les voies de signalisation anaboliques et cataboliques ont été évalués.
Dans des expériences séparées, des cellules ont été co-traitées avec des inhibiteurs sélectionnés de la dégradation des protéines afin d'évaluer l'importance des voies protéolytiques dans la perte de protéines avec l'ammoniac et l'éthanol. La combinaison d'ammoniac et d'éthanol a entraîné une réduction de la largeur du myotube et de la teneur en protéines totales, supérieure à la réduction observée avec l'ammoniac seul. L'ammoniac et l'éthanol ont tous deux entraîné une réduction de la synthèse des protéines, évaluée par l'incorporation de puromycine. Il a également été mis en évidence des altérations de la régulation de la traduction des protéines et une expression protéique accrue des marqueurs de la dégradation des protéines musculaires. La perte de protéines myotubes avec l'ammoniac et l'éthanol n'a pas été affectée par l'inhibition de l'autophagie, mais a été complètement empêchée par l'inhibition du protéasome. Ainsi, l'incubation combinée d'ammoniac et d'éthanol de myotubes en C2C12 a exacerbé l'atrophie des myotubes et la dysrégulation des voies de signalisation anaboliques et cataboliques associées à l'un ou l'autre composant individuellement.
