Un nouveau rôle pour le transporteur de zinc 8 dans la facilitation de l'accumulation de zinc et la régulation de la synthèse de la testostérone dans les cellules de Leydig de testicules humains et de souris
Xiuli Zhang /j.metabol.2018.09.002 |
Objectif
Le zinc est intimement impliqué dans la production de testostérone. Le transporteur de zinc 8 (ZnT8) est localisé dans les granules de sécrétion d'insuline en tant que transporteur de Zn spécifique aux cellules β. L'effet de ZnT8 et de l'accumulation de zinc associée dans la stéroïdogenèse reste toutefois inconnu. La présente étude visait à déterminer si le ZnT8 joue un rôle dans la facilitation de l’accumulation de zinc et la régulation de la synthèse de la testostérone dans les testicules.
Les méthodes
Des cellules de Leydig ont été isolées à partir des testicules de souris humaines, allaitantes au CD-1 et ZnT8-KO. L'accumulation de Zn dans les mitochondries a été induite par une stimulation par hCG. La transfection de hZnT8-EGFP et l'ARN interférant de mZnT8 ont été réalisés dans des cellules MLTC-1. L'expression de ZnT8 et sa co-localisation avec la protéine régulatrice stéroïdogène aiguë (StAR) ont été analysées avec les protocoles de coloration RT-PCR, Western blot et double fluorescence. Les taux sériques de testostérone chez les souris ont été déterminés avec le dosage immunoenzymatique chimioluminescent.
Résultats
ZnT8 s'est avéré présenté dans les cellules de Leydig et régulé positivement dans les cellules de Leydig de souris allaitantes et les cellules MLTC-1 après l'administration de hCG, ce qui a entraîné une accumulation de zinc dans les mitochondries. Le silençage ou l'inactivation du gène ZnT8 inhibe la production stimulée de progestérone et de testostérone, réduit l'accumulation de zinc stimulé et l'expression régulatrice stéroïdienne stéroïdique phosphorylée régulée à la baisse dans les cellules de Leydig. En outre, un inhibiteur (H89) de la PKA a bloqué la progestérone stimulée par hCG en raison de la surexpression de ZnT8 et du traitement au zinc.
Conclusion
La présente étude fournit la première preuve que le ZnT8 transporte le Zn dans les mitochondries des cellules de Leydig avec une stimulation des gonadotrophines et suggère que le ZnT8 pourrait jouer un rôle dans la production de testostérone via la voie de signalisation de la PKA.