Régulation de la synthèse des protéines musculaires dans un modèle cellulaire in vitro utilisant du sérum humain ex vivo
Brian P. Carson Physiologie expérimentale 2018
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Quelle est la question centrale de cette étude?
Le milieu conditionné par le sérum humain ex vivo peut-il réguler la synthèse des protéines musculaires dans les cellules musculaires squelettiques in vitro ?
Quelle est la principale conclusion et son importance?
Cette étude démontre que le milieu conditionné par le sérum humain ex vivo peut réguler la synthèse des protéines musculaires dans les cellules musculaires squelettiques in vitro via la voie mammaire de la Rapomycine (mTOR), et régulée différemment par le sérum humain ex vivo alimenté et à jeun .
Le sérum humain incarne la réponse systémique intégrée à toute condition ou perturbation, qui peut réguler la synthèse des protéines musculaires (MPS). Le conditionnement du milieu avec du sérum humain représente une méthode physiologiquement pertinente de régulation du MPS in vitro .
Le but principal de l'étude était le développement d'un modèle utilisant le sérum humain ex vivo pour conditionner le milieu et réguler le MPS dans les cellules musculaires squelettiques in vitro . Quatre jeunes hommes en bonne santé se sont présentés au laboratoire après un jeûne nocturne et ont reçu 0,33 g (kg de masse corporelle) -1protéine de lactosérum. Des échantillons de sang ont été prélevés avant (Fasted) et 60 min postprandial (Fed). Les cellules musculaires squelettiques C2C12 entièrement différenciées étaient privées de nutriments et de sérum pendant 1 h et ensuite traitées avec du milieu conditionné avec du sérum humain ex vivo Fasted ou Fed (20%) pendant 4 h. Le MPS a été mesuré en utilisant la détection de surface de la technique de traduction et l'activation de mTOR, P70S6K et 4EBP1 par Western blot. Le sérum humain ex vivo, à jeun et nourri, a augmenté la MPS ( P <0,05). Bien qu'un effet fort (ƞ 2 = 0,36) pour MPS augmenté dans Fed par rapport à Fasted a été observé, ce n'était pas statistiquement significatif ( P > 0,05). L'activation de mTOR, P70S6K et 4EBP1 était significativement augmentée après traitement avec Fed par rapport au sérum humain ex vivo Fasted ( P <0,05). Ici, nous avons développé et optimisé les conditions de culture des cellules musculaires squelettiques C2C12, la mesure de MPS et de signalisation dans un milieu conditionné par le sérum humain ex vivo . De plus, la fonctionnalité du modèle a été démontrée par comparaison de la réponse au milieu conditionné par le sérum humain ex vivo Fasted et Fed .